Imagerie cellulaire

Microscope droit plein champ semi-automatisé pour l’acquisition d’images en champ clair sur lames. 

Modes de lumière transmise (TL) disponibles :  

• Brightfield (BF) 
• Contraste de Phase (Ph) 
• Darkfield (DF) 
• Condenseur avec filtre Ph et DF 

Objectifs : 

• Tourelle manuelle 
• PlanN 2X/0.06 
• Fluotar 10X/0.3 Ph1 
• Fluotar 20X/0.5 Ph2 
• Fluotar 40X/0.75 Ph2 
• Fluotar 100X/1.3Oil Ph3 (sur demande) 

Caméra : 

• Leica DFC300 FX caméra couleur (RGB) 
• 1392 x 1040 pixels en mode FullFrame HQ; possible 2088 x 1560 pixels avec le 1.5x scaling 
• Balance des blancs 
• 3 x 8 bits 

Platine XY : 

• Manuelle 
• Support pour lame 

Logiciel : 

• LAS, version 3.6 
• Génération d’images .tiff avec Metadata (formats aussi disponibles : Jpeg, Jpeg2000, PNG, Bmp, psd) 

Applications possibles :  

• Prise de photos en champ clair (BF, Ph et DF) 
• Adapté pour des échantillons fixés colorés 

Microscope confocal spectral inversé à balayage laser – 3 lasers (Leica Microsystems, TCS SP5) 

Applications possibles :  

• Confocal spectral (300 nm-800 nm) 
• ZStacks  
• Projections 2D et 3D 
• Field rotator 
• Lambda stacks (précision de 3nm et une bande passante minimale de 5 nm) 
• Déconvolution spectrale 
• FRET 
• FRAP 

Objectifs : 

• PL Fluotar 10X/0.3 
• PL Fluotar 20X/0.5 
• PL Apo 40X/1.25 Oil 
• PL Apo 63X/1.4 Oil  
• PL Apo 100X/1.4 Oil  

Lasers : 

• Laser Argon (458, 476, 488, 514 nm) avec filtres accordables acousto-optiques (AOTF) 
• DPSS 561 avec AOTF 
• HeNe 633 avec AOTF 

Détecteurs :  

• 3 PMT (spectraux 300-800 nm, position 1,2 et 4)
• 1 HyD (spectral 300-800 nm, position 3) 
• TLD pour la capture d’images en champ clair (BF, DIC, POL) 

Platine : 

• Manuelle XY 

Logiciel :  

• LAS-AF (version 2.7.1) 
• Modules FRET et FRAP wizard 

Microscope confocal spectral inversé à balayage laser – 4 lasers et platine motorisée (Leica Microsystems, TCS SP5). 

Applications possibles :  

• Confocal spectral (300 nm-800 nm) 
• ZStacks  
• Projections 2D et 3D 
• Field rotator 
• Lambda stacks (précision de 3 nm et une bande passante minimale de 5 nm) 
• Déconvolution spectrale 
• FRET 
• FRAP 
• Mosaïque et multipositions 

Objectifs : 

• PL Fluotar 10X/0.3 
• PL Apo 20X/0.7 IMM Corr 
• PL Apo 40X/1.25 Oil 
• PL Apo 63X/1.4 Oil  
• PL Apo 100X/1.4 Oil  

Lasers : 

• Diode laser 405 nm avec roue à filtres (3/6/12,5/25/50/80/100 %) 
• Laser Argon (458, 476, 488, 514 nm) avec filtres accordables acousto-optiques (AOTF) 
• DPSS 561 avec AOTF 
• HeNe 633 avec AOTF 

Détecteurs :  

• 3 PMT (spectraux 300-800 nm, position 1,2 et 4) 
• 1 HyD (spectral 300-800 nm, position 3) 
• TLD pour la capture d’images en champ clair (BF, DIC, POL) 

Platine : 

• Motorisée avec Galvo-Z 

Logiciels :  

• LAS-AF (version 2.7.1) 
• Modules FRET et FRAP wizard 
• Stitching 

Microscope multiphoton confocal droit à balayage laser – 4 lasers visibles et 1 laser Ti:Saf Mai-Tai (Spectra-Physics). Chambre d’incubation pour le contrôle de la température, platine motorisée et objectifs DeepLens à immersion à eau. 

Ce microscope est généralement dédié à l’intravital sur petit animal.  

Applications possibles :  

• Laser 2-photons (690-1040 nm) 
• Chambre d’incubation (température contrôlée) 
• Plateforme intravitale (souris-rat) 
• 3NDD (Non-Descanned Detectors/RXD) 
• Confocal  
• ZStacks  
• Projections 2D et 3D 
• Scan Field rotator 
• Mosaïque et multipositions 

Objectifs : 

• UPlan SApo 4X/0.16 
• UPlan SApo 10X/0.4 
• UPlan SApo 20X/0.75 
• UPlan SApo 40X/0.95 
• UPlan SApo 60X/1.35 Oil  
• DeepLens XLUM Plan FL N 20X/1.00 W (pour intravital) 
• DeepLens LUM FL N 60X/1.10 W  

Lasers : 

• Diode laser 405 nm avec filtres accordables acousto-optiques (AOTF) 
• Laser Argon (458, 488, 515 nm) avec AOTF 
• Laser 543 nm avec AOTF 
• Laser 635 nm avec AOTF 
• Multiphoton Mai-Tai (Spactra-Physics) ajustable 690-1040nm 

Détecteurs :  

• 4 PMTs avec filtres : 
  • Ch1 : SMD 490/510/560; BA 430-470 / 480-495 / 505-525 
  • Ch2 : SMD 560; BA 505-525 / 505-605 / 535-565 
  • Ch3 : SMD 640; BA 560-620 / 590-660 
  • Ch4 : Mirror; BA 655-755 
• 3 RXD (NDD) avec filtres pour mode 2-Photons 
• TLD pour la capture d’images en champ clair 

Platines : 

• Plateforme motorisée  
• Hauteur ajustable 

Logiciels :  

• Fluoview FW10-ASW (version 3.01.03.03) 
• Stitching 

Microscope confocal à disque rotatif (Spinning Disc, SD) inversé avec module TIRFM, chambre d’incubation, module Definite Focus 2 et Piezo Z- Focus Drive. 

Ce microscope est priorisé pour la microscopie en temps réel.  

Ce microscope peut être utilisé sporadiquement pour des pathogènes de niveau 3 (type VIH/HCV). 

Applications possibles :  

• Fluorescence classique 
• Acquisitions confocales à disque rotatif 
• TIRFM 
• Expériences de vidéomicroscopie en temps réel 
• Zstacks 
• Projections 2D/3D 
• Acquisitions rapides via synchronisation matérielle 
• DIC 

Objectifs : 

• EC Plan NeoFluar 10X/0.3 DICI 
• LD PlanNeofluar 20X/0.4 DICII 
• Plan Apochromat 20X/0.8 DICII  
• Fluar 40X/1.3 Oil DICIII 
• α Plan Apochromat 100X/1.46 Oil DICIII TIRF 

Source lumineuse pour la fluorescence classique : 

• X-Cite 120Q LED (Excelitas Technologies) 

Filtres pour la fluorescence classique : 

• Filter Set 49 (G365 – FT395 – BP445/50) (DAPI, Hoescht, Alexa405) 
• Filter Set 38 HE (BP470/40 – FT495 – BP525/50) (GFP, Alexa488, FITC) 
• Filter Set 43 HE (BP550/25 – FT570 – BP605/70) (DsRed, Cy3, RFP, mCherry, Alexa555, Alexa568) 
• Filter Set 64 HE (BP587/25 – FT605 – BP647/70) (Alexa594,TexRed) 
• Filter Set 50 (BP640/30 – FT660 – BP690/50) (AF647, Cy5) 
• Filter ET-Cy7 (BP710/75 – FT760 – BP810/90)  (Alexa700+) 
• Filter Set 76 HE (TBP406+489+561 – TFT427+503+578 – TBP459+525+608) 
• Filter Set 77 (TBP482+563+642 – TFT503+582+658 – TBP524+604+688) 

Lasers pour le mode confocal à disque rotatif et TIRFM : 

• 405 nm (50 mW) SSL avec filtres accordables acousto-optiques (AOTF) 
• 488 nm (20 mW) SSL avec AOTF 
• 561 nm (40 mW) SSL avec AOTF 
• 639 nm SSL avec AOTF 

Module disque rotatif : 

• Yokogawa CSU-X1 

Filtres pour détection :  

• DBP 480/22 + LP530 
• DBP 527/54 + 645/60 
• BP 690/50 
• FF01 446/523/600/677 
• DBP 460/30 + 590/30 
• DBP 530/30 + LP650 

Caméras :  

• CCD AxioCam MRm pour la fluorescence et TIRF 
• Caméra Monochrome 14 bits 
• 1388 x 1040 pixels 
• 6.45 µm pixel size 
• EMCCD Evolve 512 (Photometrics) pour le mode confocal à disque rotatif 
• Monochrome camera 16 bits 
• 512 x 512 pixels 
• 16 µm pixel size 
• Haute sensibilité 

Platine : 

• Motorisée 
• Encodée ASI  
• Piezo MCL nano-drive (Focus drive) 

Chambre d’incubation :  

• Ibidi : Température et CO₂ / adaptateurs pour pétris (6 cm) ou lames (multipuits ou channels) 
• Tokaï Hit : Bague de chauffage pour objectifs 

Logiciels :  

• ZEN Blue (version 2012) 
• Modules Tiling et Stitching 

Microscope confocal inversé à balayage laser – 4 lasers. 

Description à venir. 

Microscope droit plein champ pour l’observation de lames en fluorescence (trois couleurs) ainsi qu’en champ clair. Pas de caméra associée. 

Objectifs : 

• 10X/0.4 
• 20X/0.75 
• 40X/0.95 
• 60X/1.3Water 

Filtres : 

• DAPI, Hoesch, Alexa405 
• GFP, FITC, Alexa488 
• TxRed, mCherry, Alexa594. 

Logiciels disponibles : 

• Imaris Full Spectrum et module déconvolution, dernière version 
• Autoquant V3 pour la déconvolution 
• FIJI / ImageJ 
• Zen Blue Lite 
• LasX Lite