Bien que la cytométrie en flux soit une technique puissante pour analyser les caractéristiques physiques et chimiques des cellules, le choix et le titrage appropriés des anticorps en sont deux aspects cruciaux. Pourquoi? Tout simplement parce que les anticorps jouent un rôle essentiel dans la détection et la quantification des protéines sur la surface cellulaire ou à l’intérieur des cellules.
Concentration optimale
Chaque anticorps a une concentration optimale à laquelle il fonctionne le mieux.
Trop d’anticorps peuvent entraîner une saturation des sites de liaison, tandis qu’une quantité insuffisante peut ne pas détecter la cible efficacement. Le titrage permet de trouver cette concentration optimale, ce qui est crucial pour obtenir des résultats fiables.
Reproductibilité expérimentale
Un autre aspect clé est la reproductibilité des expériences. Des anticorps titrés de manière cohérente d’une expérience à l’autre garantissent que les résultats sont comparables. Cela est particulièrement important dans le cadre d’études longitudinales ou de validations entre différentes études.
Coûts des anticorps
Lorsque bien titrée, la quantité d’anticorps utilisée par expérience est très souvent inférieure à la quantité recommandée par le fabricant. Bien titrer les anticorps permettra d’économiser sur les frais liés à l’expérience.
En conclusion, le titrage des anticorps est une étape essentielle dans le processus de cytométrie en flux. Il permet d’optimiser la spécificité, la concentration et la reproductibilité, assurant ainsi des résultats précis et fiables.
Rédaction : Philippe St-Onge, comité de L’écho des plateformes
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L’importance de titrer les anticorps en cytométrie en flux
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